產(chǎn)品介紹
本試劑盒采用探針法單重實時熒光PCR方法檢測豬全血、淋巴結(jié)、胰臟、脾臟、回腸、肝臟、腎臟、扁桃體、排泄物及細(xì)胞培養(yǎng)物等樣品中豬瘟病毒(CSFV)的RNA，適用于豬瘟病毒的檢測。AD-005-0為普通探針法；AD-005-1為防污染體系，添加dUTP和溫度敏感型UNG酶可有效減少氣溶膠等的污染，降低假陽性風(fēng)險。
產(chǎn)品組成
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組成 |
100頭份 |
貯藏條件 |
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反轉(zhuǎn)錄酶混合液 |
110 μL |
-20℃ |
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陰性對照（無核酸酶水） |
1 mL |
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陽性對照 |
20 μL |
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PCR 反應(yīng)液 |
900 μL |
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熒光探針 |
220 μL |
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說明書 |
1 份 |
產(chǎn)品指南
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試劑 |
體系 |
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無菌無核酸酶水 |
7×（N+1）μL |
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反轉(zhuǎn)錄酶混合液 |
1×（N+1）μL |
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PCR 反應(yīng)液 |
8×（N+1）μL |
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引物、熒光探針混合液 |
2×（N+1）μL |
將以上配制的反應(yīng)體系充分混勻后，分裝每個反應(yīng)管中各18 μL。
分別取2 μL 模板RNA，加入相應(yīng)反應(yīng)管中，混勻并作好標(biāo)記。在熒光PCR 擴(kuò)增儀上進(jìn)行以下反應(yīng)：反轉(zhuǎn)錄50℃ 5 min，預(yù)變性95 ℃ 2 min，循環(huán) 95 ℃ 10 s，60 ℃ 35 s，共40 次，每次循環(huán)的第二步（60 ℃ 35 s）收集熒光信號（報告基團(tuán)“HEX”，淬滅基團(tuán)“None”）。防污染體系在反轉(zhuǎn)錄步驟（50 ℃ 5 min）之前進(jìn)行消化步驟25 ℃ 5 min。
