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目錄號：PDP-008-1
單價：2500元
本試劑盒根據(jù)犬瘟熱病毒（CDV）、犬細(xì)小病毒(CPV)的基因特異片段分別設(shè)計(jì)引物及熒光探針（CPV-FAM、CDV-Cy5）,同時在犬基因特異片段上設(shè)計(jì)內(nèi)質(zhì)控引物及HEX熒光探針，以樣品核酸作為模板，在同一反應(yīng)管內(nèi)進(jìn)行兩種目的基因和內(nèi)質(zhì)控基因的多重RT-PCR檢測。擴(kuò)增試劑中添加dUTP和溫度敏感型UNG酶可有效減少氣溶膠等的污染，降低假陽性風(fēng)險。
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組成 |
100頭份 |
貯藏條件 |
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陰性對照（ddH2O） |
1 mL |
-20℃ |
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陽性對照（PTC） |
20 μL |
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20×反轉(zhuǎn)錄酶混合液（酶Mix） |
110 μL |
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2.5×qPCR 反應(yīng)液（qMix） |
850 μL |
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2.5×引物及探針混合液*1（引物Mix） |
850 μL |
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說明書 |
1 份 |
*1：該引物及探針混合液中包括犬瘟熱病毒（CDV）、犬細(xì)小病毒(CPV)和犬源內(nèi)質(zhì)控的引物、探針等，該混合液使用及保存時請盡量避光。
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試劑 |
體系 |
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20×反轉(zhuǎn)錄酶混合液 |
1×（N+1）μL |
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2.5×qPCR 反應(yīng)液 |
8×（N+1）μL |
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2.5×引物及探針混合液 |
8×（N+1）μL |
§ 將以上配制的反應(yīng)體系充分混勻后，分裝每個反應(yīng)管中各17 μL。取3 μL 模板DNA/RNA，加入相應(yīng)反應(yīng)管中，混勻并作好標(biāo)記。
§ 在熒光PCR 擴(kuò)增儀上進(jìn)行以下反應(yīng)：UNG酶消化25 ℃ 5 min，反轉(zhuǎn)錄55 ℃ 5 min，預(yù)變性95 ℃ 2 min；循環(huán) 95 ℃ 5 s，60 ℃ 30 s，共40 次，每次循環(huán)的第二步（60 ℃ 30 s）收集熒光信號（報(bào)告基團(tuán)“CPV-FAM、IC-HEX、CDV-Cy5”，淬滅基團(tuán)“None”）。
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